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有限稀释法

王朝百科·作者佚名 2010-05-29

有限稀释法是一种常用的克隆方法。

将需要再克隆的细胞株自培养孔内吸出并作细胞计数，计出1mL的细胞数。

用HT培养液稀释，使细胞浓度为50～60个/mL，于96孔培养板中每孔加0.1mL(五六个细胞/孔)。接种2排，剩余细胞悬液用HT培养液作倍比稀释，再接种2排，如此类推，直至使每孔含0.5～1个细胞。培养7～10d后，选择单个克隆生长的阳性孔再一次进行克隆。一般需要如此重复3～5次，直至达100％阳性孔率时即可，以确保抗体由单个克隆所产生。

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