变量试验(fluctuation test)又称波动试验或彷徨试验。1943年,Luria和 Delbrück据统计学的原理,设计了如下实验(图)。
实验要点:取对噬菌体T1敏感的大肠[1]杆菌对数期肉汤培养物,用新鲜培养液稀释成浓度为10^3/ml的细菌悬液,然后在甲、乙两试管中各装10ml。接着把甲管中的菌液先分装在50支小试管中(每管装0.2ml),保温24～36小时后,即把各小管的菌液分别倒在50个预先涂有T1的平板上, 经培养后计算各皿上所产生的抗噬菌体的菌落数;乙管中的10ml菌液不经分装先整管保温24 ～ 36小时,然后才分成50份加到同样涂有噬菌体的平板上,适当培养后,同样分别计算各皿上产生的抗性菌落数。
实验中，为了证实原始敏感大肠杆菌并没有噬菌体的个体存在，可以取一定浓度敏感菌加到含有噬菌体的平皿上，作为对照（From:《工业微生物育种学》
结果表明,来自甲管的50皿中,各皿间抗性菌落数相差极大(图,左),而来自乙管的则各 皿数目基本相同(图,右)。这就说明,E.coli抗噬菌体性状的突变,不是由所抗的环境 因素— —噬菌体诱导出来的,而是在它接触到噬菌体前,在某一次细胞分裂过程中随机地自发产生的 。这一自发突变发生得越早,则抗性菌落出现得越多,反之则越少,噬菌体在这里仅起着淘汰 原始的未突变的敏感菌和鉴别抗噬菌体突变型的作用。利用这一方法,还可计算出突变率。[1]
