一.染色液和试剂:5%孔雀绿水溶液、0.5%蕃红水溶液。
二.方法:Schaeffer与Fulton氏染色法(1)涂片:按常规方法将待检细菌(老龄菌,或营养琼脂上诱导芽孢产生的菌)制成涂片。(2)晾干固定:待涂片晾干后在酒精灯火焰上通过2—3次。(3)染色:①加染色液:加5%孔雀绿水溶液于涂片处(染料以铺满涂片为度),然后将涂片放在铜板上,用酒精灯火焰加热至染液冒蒸汽时开始计算时间,约维持15-20min。加热过程中要随时添加染色液,切勿让标本干涸。(加热时温度不能太高)。②水洗:待玻片冷却后 ,用水轻轻地冲洗,直至流出的水中无染色液为止。③复染:用蕃红液染色5min。(4)水洗、晾干或吸干。(5)镜检:先低倍,再高倍,最后在油镜下观察芽孢和菌体的形态。结果:芽孢呈绿色,菌体为红色。