Lambert-Beer定律是吸收光度法的基本定律，表示物质对某一单色光吸收的强弱与吸光物质浓度和厚度间的关系。
1．Lambert-Beer定律的推导
⑴Lambert-Beer定律的数学表达式
I0：入射光强（平行单色光）；I：透射光强
S：吸光物质截面积；l：吸光物质厚度
n：吸光质点（原子、离子或分子）数
dS = kdndS/S =（kdn）/S
（负号表示光强因被吸收而减弱）
∵ S = V（体积）/ l（厚度），n = V·C（浓度） ∴ n / S = l·C
Lambert-Beer定律的数学表达式：-lg(I/I0)= ECl
[概念]
透光率(transmitance，T)：T = I/I0
吸光度(absorbance，A)：A = -lg T =-lg(I/I0)= ECl （A与C成正比关系）
T = 10-A = 10-ElC（T与C成指数函数关系） ⑵Lambert-Beer定律的物理意义及成立条件
Lambert-Beer定律：当一束平行单色光通过均匀的非散射样品时，样品对光的吸光度与样品的浓度及厚度成正比，A = ECl。
2．吸光系数(absorptivity)
[引入] Lambert-Beer定律：A = ECl中E为比例常数，称为吸光系数。
⑴吸光系数的物理意义：吸光物质在单位浓度、单位厚度时的吸光度。是定性和定量的依据。
⑵吸光系数的两种表示方法：
摩尔吸光系数（ε或EM）：在一定波长时，浓度为1mol/L、厚度为1cm时的吸光度。多用于分子结构研究。
百分吸光系数（比吸光系数，）：在一定波长时，浓度为1%（W/V）、厚度为1cm时的吸光度。多用于含量测定。