约1511年~约1546年）
第一位探测亚马孙河的欧洲人是一位名叫弗朗西斯科·德·奥雷利亚纳的西班牙殖民地征服者。他于1535年移居秘鲁。1540年，他参加一支探险队，深入到现为厄瓜多尔内陆地区，旨在寻找一种珍贵的香料----肉桂。
探险队由冈萨罗·皮萨罗，即弗朗西斯科·皮萨罗同父异母的兄弟率领。穿越热带丛林密布地区的旅行非常艰难。几个月以后，食物快吃完了。当他们抵达纳波河时，决定将探险队一分为二。由奥雷利亚纳带领57人和一艘困在丛林时建造的小船，先行去寻找食物，然后再回来与探险队的其他成员汇合。
奥雷亚纳顺河而下，到达亚马孙河。他没有返回，而是继续航行，穿过怀有敌意部落的居住区，最后于1542年8月抵达亚马孙河河口。
上图：奥雷利亚纳声称，当他顺亚马孙河向下行驶时，水流是如此湍急，使他无法转回与同伴们会合。
亚马孙河是南美洲最长的河流。该河的得名是由于奥雷利亚纳一行在河上遭到成群好斗的当地部落妇女的攻击。这些人在探险队一行人看来，就如同希腊神话中的女斗士亚马孙人。