RNase抑制剂

王朝百科·作者佚名  2011-06-25
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RNA酶抑制剂单位定义:抑制5ng RNase A 活性的50 %所需酶量为一单位。

常用的RNase抑制剂:

1、焦磷酸二乙酯(DEPC):是一种强烈但不彻底的RNA酶抑制剂,他通过和RNA酶的活性基因团组氨酸的咪唑环结合使蛋白质变性,从而抑制酶的活性。

2、异硫氰酸胍:目前认为是最有效的RNA酶抑制剂,它在裂解组织的同时也使RNA酶失活,它既可破坏细胞结构使核酸从核蛋白中解离出来,又对RNA酶有强烈的变性作用。

3、氧钒核糖核苷复合物:由氧化钒离子和核苷形成的复合物,它和RNA酶结合形式过渡类物质,几乎能完全抑制RNA酶的活性。

4、RNA酶的蛋白质抑制剂(RNasin):从大鼠肝或人胚盘中提取得来的酸性糖蛋白.Rnasin是RNA酶的一种非竞争性抑制剂,可以和多种RNA酶结合,使其失活。

5、其他:SDS、尿素、硅藻土等对RNA酶也有一定的抑制作用。

应用范围:

体外转录

体外翻译

第一和第二链cDNA合成

在非变性条件下纯化RNA和mRNA,

RT-PCR,特别是单细胞RNA的RT-PCR

RNA结合蛋白的分离

gel retardation assays

nuclear run-on transcription assays

polysome distribution analysis

 
 
 
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