简介中文名称: 红四唑
中文别名: 2,3,5-三苯基氯化四唑; 四氮唑红
英文名称: 2,3,5-Triphenyl-2H-tetrazolium chloride
分子式: C19H15ClN4
分子量: 334.80
性质TTC是脂溶性光敏感复合物,剧毒,其溶液无色,对微生物的生长繁殖都或多或少具有抑制的作用,另外,TTC在高温灭菌条件下会被严重破坏掉,从而导致染色效果明显下降。 TTC染色是TTC和活细胞线粒体内的琥珀酸脱氢酶反应,生成红色的甲月赞(TTF),用来表示细胞的活力或者计数。存放或染色时要避光,37度条件下。
应用鲜乳中抗生素残留量检测添加量:4%
配制方法:称取1gTTC,溶于5mL灭菌蒸馏水中,装褐色瓶内于7℃冰箱保存,临用时用灭菌蒸馏水稀释至5
倍。如遇溶液变为玉色或淡褐色,则不能再用。
判断标准:观察时要迅速,避免光照过久发生干扰。乳中有抗生素存在,则检样中虽加菌液培养物,但因细菌的繁殖受到抑制,因此指示剂TTC不还原,不显色。与此相反,如果没有抗生素存在,则加入菌液即行增殖,TTC被还原,显红色,也就是说检样呈乳的原色时为阳性,呈红色为阴性。菌落总数检测添加方法:1%,1L培养基加1mL1%的TTC溶液。
添加方法:
方法(一) 在微生物培养结束后,向培养基表面喷洒1%TTC溶液适量,继续培养1~2小时后计数。注意TTC溶液是不需要无菌的,因为1小时之内是不可能生长出肉眼可见菌落的。
方法(二) 在培养基灭菌后、使用前添加TTC溶液,然后再培养观察。
作用:TTC能使菌落显红色,易于区分菌落和样品固态残渣,方便计数。测定种子活力添加量:0.5%
使用方法:
1. 浸泡 将待测种子在 30 ~ 35 ℃温水中浸种(大麦、小麦 6 小时,玉米 5 小时左右),以增强种胚的呼吸作用。
2. 显色 取吸胀的种子 200 粒,用刀片沿种子胚的中心线纵切为两半,将其中的一半置于 2 只培养皿中,每皿 100 个半粒,加入适量的 0.5% TTC 溶液,以覆盖种子为度。然后置于 30 ℃恒温箱中 1 h 。观察结果,凡胚被染为红色的是活种子。 将另一半在沸水中煮 5 min 杀死胚,作同样染色处理,作为对照观察。
3. 计算活种子的百分率
判断标准:可被种子中的还原性物质(脱氢酶)还原为红色的TTF,使活种子胚着上红色而胚乳不被染色,而死种子完全不被染色。