SOD Assay Kit - WST

王朝百科·作者佚名  2012-04-12
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厂家SOD Assay Kit - WST是由日本同仁化学研究所(Dojindo)开发的检测超氧化物歧化酶(SOD)活性的试剂盒,它具有以下特点:

1、灵敏度高,结果准确可靠

2、操作简便,重复性好

3、采用96孔板检测,省时省力

4、可一次检测多个样品

5、采用WST染色方法,可以测定100% SOD抑制率

6、众多SCI论文支持

专利WST®:WST是日本同仁化学研究所的注册商标

原理超氧化物歧化酶(SOD)能够催化超氧阴离子(O2•-)歧化,生成过氧化氢以及单质氧,是一种重要的抗氧化酶。哺乳动物细胞溶质中的SOD呈绿色,并且由两种亚单位构成,一种含有铜,另一种含有锌(Cu/Zn-SOD)。线粒体和细菌SOD为红紫色并含有锰(Mn-SOD)。E.coli含有Mn-SOD和Fe-SOD。

为了测定SOD的活性,研究人员尝试了许多间接的或者直接的方法,其中,NBT的间接法最为常用,因为它很方便。但是,NBT法有几个缺点,例如生成的染料水溶性差,而且会和黄嘌呤氧化酶的还原型发生反应。虽然cytochrome C法也常被用来做SOD检测,但它和超氧化物反应过于剧烈,不能测定低水平的SOD。SOD Assay Kit-WST®使用了Dojindo自己发明的易溶于水的噻唑盐:WST®-1(2-(4-碘苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯基)-2氢-四唑盐,二钠盐),能够和超氧阴离子反应生成水溶性的染料,因此可以简便地进行SOD的检测。WST®-1与超氧阴离子反应的剧烈程度比cytochrome C小70倍;因此,它的检测灵敏度非常高,并且能够通过将样品用buffer稀释,使背景的吸光度最小化。WST®-1不会和黄嘌呤氧化酶的还原型发生反应,因此,能够检测SOD100%的抑制率。WST®-1被超氧阴离子还原的比率与黄嘌呤氧化酶的活性线性相关,并且会被SOD所抑制(见下图)。因此,SOD或者SOD类似物的IC50(50%的抑制浓度)就能用比色法来测定。Concentration of SOD(U/ml)

反应原理

 
 
 
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