是基于物质对光的选择性吸收而建立起来的分析方法,包括比色法、可见及紫外吸光光度法及红外光谱法。
吸光光度法是采用分光器获得纯度较高的单色光,基于物质对单色光的选择性吸收测定物质组分的分析方法。
(1)方法原理 吸光光度法是借助分光光度计测定溶液的吸光度,根据朗伯一比耳定律确定物质溶液的浓度。吸光光度法是比较有色溶液对某一波长光的吸收情况。
(2)测定方法
①比较法。比较法是先配制与被测试液浓度相近的标准溶液、被测试液,在相同条件下显色后,测其相应的吸光度为A。和A。,根据朗伯一比耳定律:
两式相比得:
则得:
A
应当注意,进行计算时,只有当与相近时,结果才可靠,否则将有较大误差
吸光光度法的特点是:因人射光是纯度较高的单色光,故使偏离朗伯一比耳定律的情况大为减少,标准曲线直线部分的范围更大,分析结果的准确度较高。因可任意选取某种波长的单色光,故利用吸光度的加和性,可同时测定溶液中两种或两种以上的组分。由于入射光的波长范围扩大了,许多无色物质,只要它们在紫外或红外光区域内有吸收峰,都可以用吸光光度法进行测定。