位于市中心，有人称这是世界第三大教堂。这是一座哥特式的建筑，高106米，其外部以绿、白、红三色大理石装饰，应用建筑学、几何学原理设计修建。杜奥莫大教堂、乔托钟楼和八角形的圣乔瓦尼洗礼堂同在一个大广场上，三座大的建筑构成一体，显得格外雄伟壮观。
圣母百花大教堂(Basilica di Santa Maria del Fiore)是翡冷翠的主座教堂(Duomo)，鲜豔的大理石块拼成几何图形，即为显眼而壮观；它的大圆顶及由文艺复兴大师乔托设计的钟塔，更为巍峨的教堂带来更多的气势。 位于翡冷翠市中心的圣母百花教堂，有著一个橘红色巨大的圆顶，所以很好认，远远的就会看见它，这也几乎成了翡冷翠的重要地标。
漂亮的圆顶是1463年完成的，设计这座圆顶的布鲁内雷斯基(Brunelleschi)在建造的当时，不使用鹰架，技巧仿自罗马万神殿的圆顶，神乎奇技是最好的形容词。
此外，圆顶的内部有美术史学家兼画家的瓦萨利(Vasari)所绘的湿壁画「最後的审判」，也是非常值得欣赏的杰作。不过，这个壁画後来是由另一位画家祝卡利(Zuccari)完成的。而高达91公尺的圆顶，内部有阶梯共463级，可以爬上圆顶欣赏翡冷翠全景。
除了圆顶，主座教堂重要的建筑还包括了钟楼(Campanile de Giotto)和洗礼堂(Bittistero di San Giovanni)。
圣母百花教堂完成的时间先後不一，洗礼堂是最古老的一栋，再来是钟楼，教堂圆顶则是比较晚完成的部分。
面对著主座教堂的小广场是圣乔凡尼广场(Piazza di San Giovanni)，圣乔凡尼是翡冷翠的守护者，这裏通常是观光客集合的地方。
另外，在教堂右手边也有一块广场，称为主座教堂广场(Piazza di Duomo)，有一些贩卖纪念品的小贩和帮观光客作画的画摊。主座教堂的四周美术馆、购物市场丰富，是翡冷翠的精华区。
