医用细胞工程实验指导
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作者： 盛伟华，谢宇锋，龚爱华编著
出 版 社：
出版时间： 2008-3-1字数： 144000版次： 1页数： 117印刷时间： 2008/03/01开本： 16开印次： 1纸张： 胶版纸I S B N ： 9787122013774包装： 平装内容简介
本书是根据“细胞工程”专业课程的要求而编写的实验指导，全书包括细胞培养的基本知识、细胞培养的准备工作、正常细胞的培养技术和细胞培养的相关实验技术等33个实验，重点讲解实验过程中的基本原理、实验方法与步骤。
本实验指导与课程结合紧密，讲解清楚明了，可用作医学、生物学等专业的实验教材，也可供相关实验人员参考使用。
目录
第一章细胞培养的基本知识
一、培养细胞的形态与结构
二、培养细胞的生长方式和类型
三、培养细胞的生长特点
四、细胞的营养
五、影响细胞生长的外在因素
第二章细胞培养的准备工作
实验一细胞培养的设施及器材准备
实验二常用溶液、培养液及其配制
实验三细胞的复苏
实验四细胞的换液和传代
实验五细胞的冻存
实验六细胞计数和细胞生长曲线测定
实验七四氮唑盐（MTT）比色法
第三章正常细胞的培养技术
实验一结缔组织细胞的分离培养
实验二外周血细胞的分离培养
实验三大鼠胚胎神经细胞（组织）的分离培养
实验四间充质干细胞分离培养
第四章细胞培养的相关实验技术
实验一细胞毒性实验
实验二微核实验（Micronucleus Assay）
实验三单细胞凝胶电泳（SCGE）
实验四脂质体介导的真核细胞转染
实验五免疫细胞化学染色技术（免疫组化）
实验六VSV病毒繁殖及其效价和干扰素效价测定
实验七细胞凋亡技术
实验八细胞因子IL-2的效价检测
实验九细胞因子IL-6的效价检测
实验十细胞基因组DNA分离和鉴定
实验十一细胞总RNA的分离和鉴定
实验十二PCR技术
参考文献
书摘插图
第一章细胞培养的基本知识
一、培养细胞的形态与结构
不同组织的细胞，由于内部构造不同、生理功能不同、所处环境和条件不同，因而形态上表现为多种多样，如呈圆形、椭圆形、正方形、柱形、扁平形、梭形、星形和多边形等。另外，也有些细胞（如吞噬细胞）没有固定的形态。组织培养细胞的形态结构与体内细胞的形态结构基本相同。然而，由于细胞的生长方式不同导致其在大体形态及某些细微结构方面各有一定差异。如悬浮生长的细胞，不论细胞原来源于体仙何种类型细胞，因生长在液体环境中，胞内渗透压高于周围液体环境，因此，胞体基本呈圆形。呈贴附于支持物上生长的细胞，开始为圆形，很快过渡成扁平形，并逐渐恢复至原先的细胞形态。如来源于皮肤及其衍生物、乳腺、肝、消化道上皮等组织的细胞，由上皮性肿瘤（鳞状细胞癌）等培养的细胞均呈上皮样，上皮细胞形态为扁平的多角形，胞质近中央处有圆形的细胞核。上皮细胞紧密相靠、互相衔接成片，极性不明显。起源于中胚层的细胞，体外培养似成纤维细胞型，如纤维结缔组织、平滑肌、心肌、血管内皮、人胚肺等的细胞体外培养形态类似在体内生长的成纤维细胞，具有长短不等的数个细胞突起，因而多呈纤维状、梭形，少数呈不规则的三角形或扇形，核为卵圆形，位二靠近胞质的中央。细胞排列为漩涡状、放射状或似栅栏状。体外培养细胞类型见图1-1。
在一般显微镜下直接观察体外培养的细胞，细胞功能健康活跃时，细胞呈现均质而透明，结构极不明显。用相差显微镜可看清细胞的轮郭和内部结构。细胞有1～2核仁，用因定染色法和特殊技术可显示细胞器等结构。细胞功能状态不良时，细胞轮郭会增强，反差增大。在胞质中出现颗料、脂滴和空泡等。
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