生物化学实验原理和方法（第二版）
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作者： 陈雅蕙等编
出 版 社： 北京大学出版社
出版时间： 2008-1-1字数： 800000版次： 2页数： 497印刷时间： 2008/01/01开本： 16开印次： 4纸张： 胶版纸I S B N ： 9787301078549包装： 平装内容简介
全书分上、下篇和附录。上篇为生物化学实验原理，共十四章，对生物分子的分离纯化、含量测定和纯度分析作了较全面扼要的介绍，并着重论述各种层析技术、离心技术、膜分离技术、电泳技术等常用系列化实验方法的基本原理。下篇为生物化学实验，共选编了45个实验，包括糖类、脂类、维生素、蛋白质、酶、核酸等生生物化物质的分离制备与分析鉴定方法，如纸层析、薄层析、离子交换层析、凝胶层析、疏水层析、亲和层析、金属螯合层析、各种电泳和免疫技术，以及紫外-可见吸收光谱测定法等。其中既保留了一些对加强学生基本实验方法和技能训练行之有效的传统实验，也引进了一些较新的生化实验技术。大多数实验可以在6-12学时内完成，有些实验可以组合成一个综合实验，也可以各自独立作为一个实验，便于安排教学。每个实验后附有思考题和参考资料。附录包括各种常用数据表，供读者查阅。
本书可供综合性大学、师范、医药和农林院校生物化学及相关专业的本科生作为实验课教材，也可供相关教师和科研人员参考。
目录
上篇 生物化学实验原理
第一章 生物大分子的分离纯化
第一节 概述
第二节 生物原料的选择和预处理
第三节 生物组织与细胞的破碎
第四节 生物大分子的提取
第五节 生物大分子的分离纯化
第六节 生物大分子的活性物质的浓缩
第七节 生物大分子的结晶
第八节 生物大分子活性物质的干燥
第二章 生物大分子活性物质含量和纯度的分析方法
第一节 蛋白质含量的测定
第二节 粘多糖的定量及生物活性测定
第三节 核酸含量的测定
第四节 生物大分子纯度的鉴定
第三章 层析技术
第一节 层析技术分类
第二节 液相层析法的基本原理
第三节 柱层析系统基本操作方法
第四章 吸附层析法
第一节 基本原理
第二节 影响吸附的因素
第三节 吸附柱层析法
第五章 纸层析法
第一节 纸层析基本原理
第二节 影响Rf的主要因素
第三节 纸层析实验技术
第六章 薄层层析法
第一节 薄层层析原理
第二节 薄层层析的特点
第三节 吸附剂的性质与选择
第四节薄层层析实验技术
第五节薄层层析的定性分析
第六节薄层层析的定量分析
第七节 薄层层析法的近代发展
第七章 离子交换层析法
第一节基本原理
第二节离子交换层析介质
第三节离子交换树脂
第四节离子交换纤维素
第五节 葡聚糖凝胶离子交换剂及琼脂糖凝胶离子交换剂
第六节 离子交换层析实验技术
第七节离子交换层析法的应用
第八章凝胶层析法
第一节 引言
第二节基本原理
第三节凝胶的条件和类型
第四节凝胶层析实验技术
第五节影响凝胶层析的主要因素
第九章亲和层析法
第一节基本原理
第二节配基和载体的选择
第三节 亲和吸附剂的制备方法
第四节 亲和层析实验技术
第五节 亲和层析应用举例
第六节金属螯合亲和层析
第十章疏水层析法
第一节疏水层析原理
第二节疏水层析的分离机理
第三节影响疏水层析分离的因素
第十一章 电泳技术
第一节 电泳基本原理
第二节电泳的分类
第三节醋酸纤维素薄膜电泳
第四节琼脂糖凝胶电泳
第五节聚丙烯酰胺凝胶电泳
第六节染色方法
第七节 聚丙烯酰胺凝胶电泳过程中异常现象产生的原因及解决办法
第八节毛细管电泳
……
下篇 生物化学实验
附录
书摘插图
上篇生物化学实验原理
第一章生物大分子的分离纯化
第一节概述
生物大分子主要包括多肽、蛋白质、酶、辅酶、激素、维生素、多糖、脂类、核酸及其降解产物等。以上这些生化物质具有不同的生理功能，其中有些是生物活性物质如蛋白质、酶、核酸等，它们与人们的生活密切相关。目前这些生物活性物质已成为生命科学研究的主要对象。特别是随着人类基因组序列“完成图”的完成（2003年4月15日公布），生命科学研究将进入后基因组时代（研究的焦点将从基因的序列转移到功能方面），我国在“十五”期间将人类基因组的后续研究与开发工作列为十二个国家重大科技专项之一，国家已投入6亿元，主要开展重大疾病、重要生理功能相关功能基因等多项研究。为此，鉴定大量未知蛋白质（酶）的结构及关于其功能研究也必将进入一个空前活跃的时期，因此分离纯化和测试分析蛋白质技术显得十分重要。
与核酸相比，蛋白质的结构更具有奇妙独特的复杂性和艺术性。它是由20多个不同性质（或极性）的氨基酸交互排列而成，不仅潜在的数量多达20（100）、种（这就是蛋白质构成如此巨大的、丰富多彩的生命世界的原因），而且相互间差异大。因此，相对而言，蛋白质的分离、纯化和鉴定有较大的难度和特殊性。而核酸的结构，虽然也有异乎寻常的多样性，但是，它是由结构相似、理化性质比较接近的4个碱基交互排列，且有一定规律可循。因此，核酸的分离、制备和鉴定比较容易。
另外，蛋白质和核酸类物质通常是与自然界存在的诸多不同化合物结合在一起，或者是蛋白质和核酸自身相互组合在一起出现的，加之它们离体后稳定性较差（如酶）、含量偏低，这都给分离纯化带来了一定的困难。
此外生物活性物质都有复杂的空间结构，而维系这种特定的三维结构主要靠氢键、盐键、二硫键、疏水作用力和范德华引力等。这些生物活性物质对外界条件非常敏感，过酸、过碱、高温、剧烈的振荡等都可能导致活性丧失，这是生物大分子物质不同于其他物质的一个突出特点。因此，在整个分离、纯化流程中，要选择十分温和的条件，尽量在低温条件下操作。同时还要防止体系中的重金属离子及细胞自身酶系的作用。为了得到高纯度的生物产品，必须要认真了解生物活性物质的一些特性与特点。
……
