现代细胞生物学技术
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作者： 辛华主编
出 版 社： 科学出版社
出版时间： 2009-1-1字数：版次： 1页数： 303印刷时间：开本： 16开印次： 1纸张：I S B N ： 9787030216908包装： 平装编辑推荐
本书编入实验共119个，内容涉及研究显微镜与显微图像分析技术、电子显微镜技术、细胞化学技术（细胞化学、酶、免疫、荧光细胞化学）、细胞培养技术、培养细胞凋亡检测技术、细胞融合技术、细胞与细胞器的分离技术、细胞的原位杂交技术、流式细胞术、真核细胞基因转染与表达技术、哺乳动物基因敲除技术和干细胞与组织工程技术等。本书对每个实验项目的原理、技术方法及注意事项都有充分的阐述，并附有大量彩色显微照片。
内容简介
本书为高等院校研究生学习细胞生物学技术用书，全书共12章，涵盖了细胞生物学经典实验方法和当今细胞生物学的一些新技术、新方法，既可用于研究生细胞生物学技术教学，又可作为细胞生物学技术工具书使用。
本书编入实验共119个，内容涉及研究显微镜与显微图像分析技术、电子显微镜技术、细胞化学技术（细胞化学、酶、免疫、荧光细胞化学）、细胞培养技术、培养细胞凋亡检测技术、细胞融合技术、细胞与细胞器的分离技术、细胞的原位杂交技术、流式细胞术、真核细胞基因转染与表达技术、哺乳动物基因敲除技术和干细胞与组织工程技术等内容。
本书对每个实验项目的原理、技术方法及注意事项都有充分的阐述，并附有大量彩色显微照片，以加深感性认识。本书注重体现理论意义和实际应用价值，适用于生物学、医学、农学、师范院校的教师、研究生以及科研人员使用。
目录
前言
第1章 研究显微镜与显微图像分析技术
1.1 普通光学显微镜的构造和使用
1.2 倒置相差显微镜的原理及使用
1.3 荧光显微镜的原理及使用
1.4 激光扫描共聚焦显微镜技术
1.5 显微操作技术
1.5.1 体细胞显微注射技术
1.5.2 受精卵显微注射技术
1.6 活细胞荧光显微成像技术
1.7 细胞显微图像分析技术
第2章 电镜技术
2.1 透射电镜
2.2 TEM样品制备技术
2.2.1 TEM超薄切片技术
2.2.2 TEM负染色技术
2.2.3 TEM细胞化学技术
2.2.4 石蜡组织与石蜡切片的TEM样品制备
2.3 扫描电子显微镜
2.4 SEM样品制备
2.4.1 常规SEM生物样品制备
2.4.2 SEM游离细胞制备
2.4.3 SEM免疫细胞化学技术
第3章 细胞化学技术
3.1 普通细胞化学
3.1.1 细胞化学理论知识
3.1.2 PAS（periodic acid Sehiff reaction）法显示糖原
3.1.3 苏丹Ⅲ染色法显示脂类
3.1.4 酸性蛋白与碱性蛋白的显示
3.1.5 细胞骨架微丝蛋白的显示
3.1.6 Feulgen法显示核酸
3.1.7 甲基绿-派洛咛法显示核酸
3.1.8 Giemsa染色法显示染色质/体
3.1.9 苏木精-伊红染色显示细胞核和细胞质
3.2 酶细胞化学
3.2.1 酶细胞化学的基本理论
3.2.2 碱性磷酸酶显示
3.2.3 金属沉淀法显示酸性磷酸酶
3.2.4 联苯胺法显示过氧化物酶
3.2.5 通过琥珀酸脱氢酶活性进行MTT法检测细胞相对存活率
3.3 免疫细胞化学
用ABC方法来鉴定体外培养的小鼠星形胶质细胞
3.4 荧光细胞化学与免疫荧光细胞化学
3.4.1 吖啶橙荧光染色法
3.4.2 间接免疫荧光细胞化学法显示细胞中的微管蛋白
3.4.3 用双重免疫荧光标记法鉴定体外培养的小鼠神经元和神经胶质细胞
3.4.4 用双重免疫荧光法鉴定组织切片中的两种细胞的方法
第4章 细胞培养技术
4.1 细胞培养的基本原理与技术
4.1.1 细胞在体外生长的条件
4.1.2 培养细胞常用设备和用品
4.1.3 培养用品的清洗
4.1.4 培养用品的灭菌与消毒
4.1.5 无菌操作的基本要领和要求
4.1.6 细胞培养用液
4.2 细胞培养的方法
4.2.1 原代细胞培养
4.2.2 细胞传代培养
4.3 体外培养细胞的观察方法
4.3.1 培养细胞的生长特征与形态分型
4.3.2 培养细胞固定、染色观察的一般标本制备
4.3.3 细胞计数方法
4.3.4 细胞的显微测量
4.4 培养细胞的冻存、复苏与运输
4.5 培养细胞增殖动力学方法
4.5.1 生长曲线的测定
4.5.2 分裂指数测定
4.5.3 克隆（集落）形成试验
4.5.4 BrdU掺入法测定细胞增殖指数
4.6 肿瘤细胞黏附和侵袭能力的体外检测方法
4.6.1 肿瘤细胞的黏附能力分析实验
4.6.2 细胞侵袭重建基底膜实验
4.6.3 肿瘤细胞迁移实验
4.7 哺乳动物正常组织细胞的体外培养与应用
4.7.1 胎鼠大脑皮层神经细胞的原代培养方法
4.7.2 含药血清对体外培养细胞的药理实验
4.7.3 四氯化碳致肝细胞损伤及SOD活性检测
第5章 培养细胞凋亡检测技术
5.1 光学显微镜形态学检测
5.1.1 台盼蓝染色法显示凋亡细胞
5.1.2 苏木精-伊红染色（HE染色）显示凋亡细胞
5.1.3 Giemsa染色法显示凋亡细胞
5.1.4 吖啶橙荧光染色显示凋亡细胞
5.1.5 Ho.33342与PI荧光双染显示凋亡与坏死细胞
5.2 凋亡细胞的超微结构观察
5.2.1 透射电镜观察凋亡细胞
5.2.2 扫描电镜观察凋亡细胞
5.3 凋亡细胞琥珀酸脱氢酶活性检测（MTT法）
5.4 DNA电泳检测凋亡梯状带
5.5 细胞膜磷脂酰丝氨酸荧光显示
5.6 凋亡细胞原位末端标记
第6章 细胞工程
6.1 细胞融合
6.1.1 聚乙二醇介导的细胞融合
6.1.2 细胞电融合
6.1.3 早熟染色体凝集的诱导和观察
6.2 细胞的分离
6.2.1 淋巴细胞的分离纯化
6.2.2 死活细胞的分离
6.3 细胞器的分离
第7章 原位杂交技术
7.1 地高辛标记的原位杂交
7.2 放射性同位素标记的原位杂交
7.3 胚胎整体原位杂交
第8章 细胞化学成分的分离与测定
8.1 蛋白质SDS-PAGE凝胶电泳
8.2 真核细胞基因组DNA的提取
8.3 真核细胞RNA的提取
8.4 免疫沉淀法分离并定量分析目的蛋白质
8.5 蛋白质免疫印迹法
8.6 蛋白质双向电泳分析细胞和组织中的蛋白质群
第9章 真核细胞基因转染与表达技术
9.1 DNA转染技术
9.1.1 磷酸钙转染技术
9.1.2 脂质体转染技术
9.2 基因在细胞中表达的检测技术
9.2.1 DNA印迹杂交法
9.2.2 RNA印迹杂交法
9.2.3 蛋白印迹杂交法
9.2.4 绿色荧光蛋白基因转染及检测
第10章 哺乳动物基因敲除技术
10.1 常用基因打靶载体的设计原则
10.1.1 P21（wAFl）基因打靶载体的构建
10.1.2 C-Crk基因打靶载体的构建
10.1.3 视黄醇脱氢酶RDH15基因打靶载体的构建
10.2 胚胎干细胞基因敲除
10.2.1 胚胎干细胞的增殖和维持
10.2.2 胚胎干细胞标准电穿孔
10.2.3 鉴定、筛选重组的胚胎干细胞
10.3 嵌合体小鼠的制备
10.3.1 嵌合体小鼠的产生
10.3.2 GPI同工酶的水平淀粉凝胶电泳检测嵌合体小鼠
10.4 基因敲除小鼠的建立
10.4.1 提取鼠尾DNA用PCR来检测敲除基因
第11章 干细胞和组织工程技术
11.1 胚胎干细胞培养技术与方法
11.1.1 小鼠胚胎干细胞的分离、培养及诱导分化
11.1.2 人胚胎干细胞的分离和培养
11.1.3 人类胚胎干细胞定向分化成神经细胞
11.2 成体干细胞培养技术与方法
11.2.1 成人骨髓基质干细胞培养、纯化及鉴定
11.2.2 人造血干/祖细胞的体外培养与检测技术
11.2.3 大鼠胚胎脑神经干细胞和祖细胞的分离培养
11.3 神经组织工程
第12章 流式细胞术
12.1 流式细胞仪的结构、工作原理及应用
12.2 流式细胞仪检测细胞膜受体（直标法）
12.3 流式细胞仪同时检测细胞内和细胞外抗原
12.4 流式细胞仪检测细胞凋亡（PI单染色法）
12.5 流式细胞仪检测细胞凋亡和坏死（PI和Annexin V-FITC双染色法）
12.6 流式细胞仪检测凋亡细胞内游离钙离子浓度变化
图版
书摘插图
第3章细胞化学技术
细胞化学（cytochemistry）或组织化学（histochemistry）是生命科学和医学研究以及临床诊断中不可缺少的重要的技术手段，是一门在保持组织、细胞原有生活结构状态及化学成分的基础上，利用物理学、化学、免疫学、分子生物学等原理与技术，对组织与细胞内的化学成分及其变化规律进行定性、定位、定量研究的科学。
这门科学最早创立于1826年，但早期的近100年进展缓慢，至20世纪30年代才逐渐发展起来。1936年创立了酶组织化学，后来随着电镜和超薄切片技术的发明及细胞生物学、免疫学、生物化学和分子生物学的迅速发展，组织化学技术手段不断丰富、创新、发展，而成为现代细胞化学。现代细胞化学包括经典的细胞化学、酶细胞化学、免疫细胞化学、荧光细胞化学、电镜细胞化学、细胞的原位杂交等。检测仪器除了光学显微镜、荧光显微镜、电子显微镜外，还可使用显微分光光度计、图像分析仪、流式细胞仪及激光共聚焦显微镜等对组织细胞内生物大分子进行更精确的定性、定位、定量研究分析。这门科学除了对组织进行研究外，对体外培养细胞、腹腔液细胞、血细胞等独立存在的细胞也可以进行研究分析。细胞化学这个概念已远远超越了早期原有的范围，无论从理论、内容、技术手段和研究范围都比过去更广泛、更深入。
利用细胞化学技术可检测动物、人等有机体的不同发育阶段、不同组织部位及异常、生理、病理状态下组织细胞内结构或功能成分的表达及变化特点，从而研究个体发育过程中细胞增殖与分化，遗传与发生机制以及疾病的病因、病理诊断等，随着生命科学后基因组计划的执行，现代细胞化学已经体现出它的重要价值。
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