酶学实验手册
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作者： 〔德〕比斯瓦根著，刘晓晴译
出 版 社：
出版时间： 2009-2-1字数： 268000版次： 1页数： 235印刷时间： 2009-02-01开本： 16开印次： 1纸张： 胶版纸I S B N ： 9787122035226包装： 平装内容简介
本书介绍了酶学中的实验方法。内容涉及酶反应、酶测定的基本理论、酶的实验室操作、酶的技术应用和测定仪器等实用性很强的内
容，是一本可操作性很强的实验室酶学手册。在内容编排上体现了下列特色：
列出了大约60种不同的酶的具体测定方法：
详细介绍了蛋白质结合和固定化酶的测定方法。
作者Hans Bisswanger教授一直从事于酶学领域的研究而且有着几十年的教学经验，他在总结教学实践和科学研究的基础上写成本书。本书可供生物化学、分子生物学、发育生物学、生物工程等领域的研究生和高年级本科生阅读，也可供上述领域研究人员参考。
目录
1引言
2酶命名
3酶反应
3.1酶反应理论
3.1.1反应级数
3.2米氏方程
3.3酶测定理论
3.3.1反应曲线分析
3.3.2如何进行酶测定
3.3.3酶活力
3.4偶联酶反应理论
3.4.1双偶联酶反应
3.4.2三偶联酶反应
3.5底物测定
3.5.1终点法
3.5.2偶联酶反应
3.5.3动力学方法测定底物
3.5.4酶的循环
3.6仪器方面
3.6.1分光光度法
3.6.2电化学方法
3.6.3释放或消耗气体的反应的分析
3.7酶的测定
3.7.1总论
3.7.2应用方面
3.7.3缓冲液和溶液
3.7.4氧化还原酶测定
3.7.5丙酮酸脱氢酶复合体（PDHC）
3.7.6α-酮戊二酸脱氢酶复合体（OGDHC）
3.7.7转移酶
3.7.8水解酶
3.7.9蛋白酶
3.7.10裂解酶
3.7.11异构酶
3.7.12由酶循环确定烟酰胺核苷酸
3.8多种方法
3.8.1蛋白质测定
3.8.2磷酸测定
3.8.3酶溶液浓缩
3.9酶免疫测定
3.9.1非竞争固相酶免疫测定
3.9.2竞争固相酶免疫测定
3.9.3酶免疫测定方法
4结合测定
4.1不可逆结合、可逆结合、特异性结合和非特异性结合
4.1.1总论
4.1.2实验
4.2根据大小不同进行结合测定
4.2.1超滤
4.2.2平衡透析
4.2.3结合测定的计算
4.2.4凝胶过滤
4.2.5超离心
4.3分光光度技术
4.3.1示差分光光度法
4.3.2荧光分光光度法
4.4结合测定的其他方法
4.4.1放射性标记
4.4.2反射计干涉分光光度法
5酶的技术应用
5.1酶固定化原理
5.1.1吸附
5.1.2包埋
5.1.3微囊法
5.1.4交联
5.1.5共价结合到固体支持物
5.2酶固定化方法
5.2.1微胶囊化尼龙珠
5.2.2丙烯酰胺包埋
5.2.3酶在非孔玻璃表面的共价固定化
5.2.4可调孔玻璃的固定化
5.2.5共价固定化酶到聚酰胺
5.2.6用三乙基氧四氟硼酸的烷基化
5.2.7聚酰胺部分水解后固定化酶到氨基
5.2.8聚酰胺部分水解后固定化酶到羧基
5.2.9固定化酶到聚酯
5.2.10用碱水解和氯甲苯活化的固定化
5.2.11碱水解和由二吲哚碳酰的活化
5.3固定化酶的分析
5.3.1蛋白质测定
5.3.2酶测定
5.4酶反应器
5.4.1批式反应器（搅拌罐式反应器）
5.4.2膜式反应器
5.4.3固体床式反应器
5.4.4固定化细胞
5.5生物传感器
5.5.1酶电极
5.5.2免疫电极
5.5.3其他生物传感器
5.5.4生物亲和传感器
5.6固定化酶与治疗
附录酶的EC号列表
索引
书摘插图
3酶反应
3.3酶测定理论
3.3.1 反应曲线分析
测定酶反应实验的一个首要难点是：酶反应并不是像火车一样总是以一个恒定的速度前进，它不是遵循简单的定时过程，而是不同的阶段彼此融合。由于酶的特殊性、选择的条件以及其他因素，如不同阶段或多或少的融合，因此，除非有一个关于酶反应比较清楚的基本原则，否则对酶反应的分析将会导致错误的判断。
幸运的是，数不清的酶反应可以用一个单一的、相对简单的关系来描述，就是上面提到的米氏方程。然而米氏方程也有它的局限性，第一个局限性就是，这个方程起源于不可逆的单一底物的反应情况，但大多数的酶反应都被认为是可逆的，有两个或更多的底物，同时也包括辅助因子或辅酶。考虑所有这些因素，酶反应的关系变得复杂。然而，如此难的关系也可以通过简化归纳为米氏方程的单一形式，比如说仅限于初速度或只考虑除了可变的底物外所有组分都作为常数。然而，这种简化并不总能保证在实验条件下真正地应用。
一般来说，酶实验有两个目的：测定酶活力或者计算底物浓度。尽管为了达到这两个目的需要不同策略，但两者的实质都是了解酶反应过程。因此，首先对一个普通的酶反应进行讨论。
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