科技日报讯(记者王建高通讯员王吉清)我国首例健康成活胎儿皮肤上皮细胞克隆牛———康康,于11月3日下午6点零5分在山东莱阳农学院动物胚胎工程中心实验场诞生。据现场的烟台市公证处的公证人员认证,这是迄今为止我国唯一健康成活的体细胞克隆牛。
据介绍,该项技术是在莱阳农学院名誉教授、国际著名胚胎工程专家、日本山口大学博士生导师铃木达行教授的指导下,由莱阳农学院动物胚胎工程中心留日博士董雅娟副教授和动物胚胎工程中心主任柏学进教授共同完成的。这头克隆牛是以-35℃冷冻保存的牛胎儿皮肤细胞为供核细胞,进行5—6代继代培养后,利用血清饥饿培养法使供核体细胞周期同期化( G O、G1),经显微操作移入去核成熟卵母细胞的卵周间隙,通过电融合和激活处理后的核移植重构胚,应用简易培养器进行发育培养至桑椹胚—囊胚期胚胎。
2001年2月5日将获得的克隆胚胎移植给同期发情后第6天的受体牛黄体侧子宫角,共移植5头受体,每头受体牛移植2—3枚克隆胚胎,最终获得2头妊娠(9902号、9912号受体)。9902号牛于2001年11月3日下午6点零5分产下一头健康雌性黑色犊牛,体重30公斤,体长64厘米,胸围72厘米,呼吸次数28次/分钟,心跳次数170/分钟。9912号牛也将于明后两天产犊。专家认为,动物克隆技术是动物生物技术的重要组成部分。该技术不但对解释细胞分子生物学、发育生物学和生殖生物学中关于核质关系、衰老、基因表达与调控和细胞分化等理论问题有重要意义,而且将克隆技术与胚胎干细胞和外源基因导入等技术有机融合,对“动物生物反应器”构建和“再生医学(组织工程)”的形成和发展更具不可替代的作用,它必将推动生命科学的快速发展,造福于人类。
该项成果与国际牛克隆技术相比,其创新点是:(1)在卵母细胞去核时,用点击法代替了挤压、吸取等方法,该方法的优点是减少了对卵母细胞质的损伤,成功率高。(2)改进了胚胎的培养系统,有利于克隆胚胎发育和产业化开发。(3)用冷冻的胎儿皮肤上皮细胞进行克隆胚胎的制作,对濒危和珍稀动物的保存提供了新的方法。
克隆牛的研究成功,标志着我国克隆牛研究技术已达到国际领先水平,为我国未来实施克隆牛良种产业化生产技术,奠定了良好基础。