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Coombs试验

王朝百科·作者佚名  2010-01-13
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1945年,英国免疫学家Coombs等人发明了能检测红细胞表面抗体的一种新试验,故称之,亦即抗人球蛋白试验。这是诊断免疫溶血性贫血的主要方法。 最早和现在常用的抗人球蛋白试剂是广谱抗血清,即抗IgG+抗补体。国外研究发现,如采用特异的抗IgG、IgM或抗补体的试剂,红细胞表面的抗体是IgG和补体约占40%,单纯IgG占35%,单纯补体占10%,极少数病例是IgA或IgM。补体几乎都是C 3 b,即未激活的C 3 。 Coombs直接试验:将洗涤过的红细胞2%混悬液加入Coombs试剂,混和后离心一分钟促进凝集。如果肉眼或显微镜下能见到红细胞凝集,即为阳性,说明红细胞表面有不完全抗体或补体。阳性结果可见于自体免疫溶血性贫血、输血反应、某些药物或疾病引起的免疫溶血性贫血。 Coombs间接试验:先将受试的血清加入等量5%适当的正常红细胞(Rh阳性的O型红细胞),在37℃温育30~60分钟,以促使血清中的半抗体结合于红细胞上(致敏),将红细胞充分洗涤,以后同直接试验。如果红细胞发生凝集而正常对照(未经与受检血清温育的正常红细胞)不凝集,即为阳性,表明受试的血清中存在不完全抗体。

[项目名称] 抗人球蛋白试验

此项化验分直接试验和间接试验,主要用于自身免疫性溶血性贫血(AIHA)的筛选和分型。

[别名] Coombs’试验(库姆试验)

[英文缩写] Coombs

[试验原理]

抗球蛋白试验是抗球蛋白参与的一种间接血凝试验,1945年由Coombs建立。用于检测抗红细胞不完全抗体。

不完全抗体多半是7S的IgG类抗体,是一类单价抗体,体积短小,因此虽能与相应抗原牢固结合,但在一般条件下不出现可见反应。

抗人球蛋白试验利用抗球蛋白抗体作为第二抗体起到桥梁的作用,连接与红细胞表面抗原结合的特异性抗体,是红细胞凝集,故又称桥梁凝集反应。

[方法]

(1)直接coombs试验 用于检测已粘附在红细胞表面的不完全抗体。即将受检红细胞充分洗涤后,将抗球蛋白试剂加入已结合有抗体的受检红细胞悬液中,即可见细胞凝集。可用玻片法做定性试验,也可用试管法或微量法做半定量测定。用于检测新生儿溶血症、自身免疫性贫血和医源性溶血性疾病等。

(2)间接coombs试验用于检测游离在血清中的不完全抗体。即将待测血清标本加入具有特异抗原的红细胞悬液中,如果抗原抗体相应则发生结合,再加入抗球蛋白抗体,则出现红细胞凝集。本法多用于检测母体Rh(D)抗体以及因红细胞不相容的输血而产生的血型抗体。此外也可用专一特异性的抗球蛋白血清,如抗IgG、抗IgM、抗IgA、抗补体血清等,分析与红细胞表面结合的不完全抗体的Ig亚类。

[参考值]直接和间接Coombs’试验均为阴性

[临床意义]

(1)阳性见于AIHA,直接Coombs’试验较间接试验对AIHA更有诊断价值。用特异性单价抗血清可将AIHA分为三型:IgG/C3阳性,占67%;单独IgG性,占20%;单独C3性,占13%;

(2)药物免疫性溶血性贫血及同种免疫性溶血性贫血也可阳性。

(3)Coombs’试验阴性有时并不能排除AIHA。

[要求]用肝素或EDTA抗凝血做直接Coombs’试验,血清做间接Coombs’试验。

[注意事项] 受检血标本必须新鲜;洗涤后的红细胞和器材都不能残留有血浆蛋白,以免出现假阴性。

 
 
 
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