
elisa是一种免疫测定。免疫测定(immunoassay,ia)是应用免疫学技术测定标本的方法。在临床检验中主要通过抗原抗体反应检测体液中的抗体或抗原性物质。
今天,小编为大家介绍elisa竞争法的实验操作方法。


工具/原料
elisa试剂盒(elabscience,e-el-0065c)
酶标仪(450nm波长滤光片)
高精度移液器,ep管及一次性吸头:0.5-10μl, 2-20μl, 20-200μl, 200-1000μl
37℃恒温箱,双蒸水或去离子水
吸水纸
方法/步骤
1:加样。弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约350μl /每孔,甩干并在吸水纸上轻拍将孔内液体拍干。
2:每孔加酶结合物工作液(临用前15分钟内配制)100μl,加上覆膜,37℃温育30分钟。弃去孔内液体,甩干,洗板5次,
3:每孔加底物溶液(tmb)90μl,酶标板加上覆膜37℃避光孵育15分钟左右(根据实际显色情况酌情缩短或延长,但不可超过30分钟。当标准孔出现明显梯度时,即可终止)。
4:每孔加终止液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物溶液的加入顺序相同。立即用酶标仪在450nm波长测量各孔的光密度(od值)。应提前打开酶标仪电源,预热仪器,设置好检测程序。

注意事项
酶标板:刚开启的酶标板孔中可能会有少许水样物质,此为正常现象, 不会对实验结果造成任何影响。暂时不用的板条应拆卸后放入备用铝箔袋,按推荐温度存放!
试验中请穿着实验服并带乳胶手套做好防护工作。特别是检测血液或者其他体液样品时,请按国家生物试验室安全防护条例执行。
希望本文如何操作竞争elisa法能帮到你。