在地方性流行区或霍乱正在流行的地区，凡见急性起病，先泻后吐，无腹痛，无里急后重，不发热，大便呈水样、黄水样或米泔水样，并有脱水、四肢厥冷、血压下降、皮肤粘膜发绀等典型临床表现者，即应按霍乱病人处理，并作以下各项实验室检查。
常用的实验室检查有：
(1)直接镜检：①直接涂片染色：将标本涂片，固定后用1∶10稀释石炭酸复红染色和革兰氏染色，镜检有无典型弧菌。典型霍乱弧菌互相连接平行排列，有如“鱼群”。②悬滴标本：将标本制成悬滴，镜检细菌动力，最好用暗视野显微镜。霍乱弧菌运动活泼，呈小鱼穿梭状。
(2)分离培养：将吐泻物直接或先经碱性胨水增菌后，接种于庆大霉素琼脂等培养基，容易检出霍乱弧菌。应用荧光抗体检测粪便中霍乱弧菌，可于1～2小时内获得结果。
(3)血清学检查：可作血清凝集试验。在发病第1～3日及第10～15日各取1份血清，若第2份血清的抗体效价比第1份增高4倍或4倍以上，有诊断参考价值。
(4)制动试验——快速诊断：在急性病人的水样便中含有大量弧菌，如悬滴检查阳性，再滴加不含防腐剂的霍乱多价血清(使用浓度为1∶64)，几分钟内细菌运动停止，凝集成块即为阳性。
若具备下列条件之一者，可确诊为霍乱：①凡有腹泻、呕吐等症状，大便培养霍乱弧菌阳性者；②霍乱流行期间，在疫区有典型霍乱症状，大便培养阴性，而无其他原因可查者；③有吐泻症状，霍乱弧菌培养阴性，作血清凝集试验第2份血清抗体效价呈4倍以上增高者。
在非疫区，凡有典型泻吐症状，在病原学检查未确定时，或在霍乱流行期间，曾接触过霍乱患者，有腹泻症状而无其他原因可查者，均应高度怀疑为霍乱，在给予积极处理的同时，应作大便培养，隔日1次，连续3次阴性者，才可以否定诊断，并作出疫情更正报告。