生物化学实验-工科专业适用(高校教材)
分類: 图书,自然科学,生物科学,生物化学,
作者: 李明元,唐洁主编
出 版 社: 中国轻工业出版社
出版时间: 2008-7-1字数: 184000版次: 1页数: 149印刷时间: 2008/07/01开本: 16开印次: 1纸张: 胶版纸I S B N : 9787501964307包装: 平装内容简介
生物化学是生命科学领域中最活跃的分支学科之一,其实验方法和技术是生物化学发展的重要组成部分。掌握生物化学实验的基本原理和操作技术,对包括食品科学与工程、制药工程、环境工程等专业在内的工程专业的学生是必不可少的,而且对于培养学生的科学精神、科研及实际工作能力、分析问题与解决问题的能力等都是非常重要的。本教材是在西华大学“生物化学(工科)”省级精品课程建设的基础上,邀请同行专家集体编写而成。在精选实验项目上体现了以下教学目的:
第一,生物化学实验基本操作技能的训练,如生化实验中常用仪器的使用、生物物质的分离、纯化、分析技术等。通过这些实验,使学生掌握生物化学的基本操作技术,为后续课程的实验、毕业论文以及将来的科研和实际工作打好基础。
第二,基础生物化学实验的掌握,如糖、蛋白质、核酸等的性质实验、代谢实验,分子生物学基础实验等内容。通过这些实验,使学生加深对课堂知识的理解,进一步掌握生物物质的特点和规律,以及在工业生产中的应用。
第三,综合运用知识能力的培养。为适应素质教育、创新教育的需要,本教材在传统生物化学实验的基础上,增加了综合性、设计性实验的内容,在教师的指导下,由学生根据已有知识,自己设计实验方案,尝试自己分析实验结果,进一步培养学生的综合应用能力、分析与设计能力、逻辑思维能力。
第四,工程意识和工程能力的培养。突出工科专业特点是本教材的特色与亮点,我们在实验项目的选择、实验材料与预处理方法的确定、结果与数据处理等方面,尽可能结合相关工业生产的实际问题,理论联系实际,在培养基本技能的同时,培养学生解决实际工程问题的能力,潜移默化地强化学生的工程意识。
目录
第一章概论
第一节实验室基本常识
一、生物化学实验室安全与防护常识
二、生物化学实验的基本要求
第二节生物化学实验基本操作
一、实验室常用仪器的使用
二、生物化学的分离、纯化、分析技术概述
第二章基础生物化学实验
第一节生命物质化学实验
实验1糖的呈色反应和定性鉴定
实验2植物中还原糖和总糖的测定——3,5-二硝基水杨酸比色法
实验3种子粗脂肪的提取
实验4血清胆固醇的测定——磷硫铁法
实验5纸层析法分离鉴定氨基酸
实验6谷物种子中赖氨酸含量的测定
实验7蛋白质的性质实验
实验8蛋白质含量测定——双缩脲法、考马斯亮蓝法、紫外分光光度法
实验9血清蛋白的醋酸纤维薄膜电泳
实验10正交法测定几种因素对酶活力的影响
实验11枯草杆菌蛋白酶活力测定
实验12脲酶km值的简易测定
实验13细胞色素c的制备及测定
实验14核酸含量的测定
实验15维生素A的测定——比色法
第二节生命物质代谢实验
实验16脂肪酸的口一氧化
实验17多酚氧化酶的纯化和活力测定
实验18酪蛋白的制备
实验19SDS-PAGE电泳测定蛋白质相对分子质量
实验20胰岛素和肾上腺素对血糖浓度的影响
实验21肝糖原的提取与鉴定
第三节核酸化学实验
实验22离子交换柱层析分离核苷酸
实验23酵母RNA的提取及组分鉴定
实验24DNA的琼脂糖凝胶电泳
实验25质粒DNA的微量提取、纯化
实验26植物中DNA的提取
实验27聚合酶链式反应
第三章综合性实验
实验28血清γ-球蛋白的分离、纯化与鉴定
实验29酪氨酸酶的提取及其酶促反应动力学研究
实验30固定化酵母细胞及蔗糖酶的检测
实验31发酵过程中无机磷的利用和ATP的生成(ATP的生物合成)
实验32兔抗人血清抗体的制备和效价测定
实验33有机废水的COD测定
第四章设计性实验
实验34蛋白质的制备及其含量的测定
实验35茶叶中茶多酚类物质的提取与含量测定
实验36天然产物中多糖的提取、纯化与鉴定
实验37蛋白质的表达、分离、纯化和鉴定
附录
一、试剂配制的一般注意事项
二、玻璃仪器的洗涤方法
三、实验样品的准备
四、常用缓冲液的配制
五、实验室中常用参数
参考文献
书摘插图
第一章 概论
第一节 实验室基本常识
一、生物化学实验室安全与防护常识
1.实验室安全
在生物化学实验中,经常要与有腐蚀性、易燃、易爆性和毒性很强的化学药品及有潜在危害性的生物材料直接接触,经常要用到煤气、水、电,因此,安全操作是一个至关重要的问题。
(1)熟悉实验室煤气总阀、水阀门及电闸门所在处。离开实验室时,一定要将室内检查一遍,应将水、电、煤气的开关关好。
(2)熟悉如何处理着火事故。在可燃液体燃着时,应立刻转移着火区内的一切可燃物质。酒精及其他可溶于水的液体着火时,可用水灭火;乙醚、甲苯等有机溶剂着火时,应用石棉布或沙土扑灭。
(3)了解化学药品的警告标志
(4)实验操作过程中凡遇到能产生烟雾、有毒性或腐蚀性气体时,应在通风橱中进行。
(5)使用毒性物质和致癌物质必须根据试剂瓶上标签说明严格操作,安全称量、转移和保管。操作时应戴手套,必要时戴口罩或防毒面罩,并在通风橱中进行。沾过毒性、致癌物的容器应单独清洗、处理。
(6)废液,特别是强酸和强碱不能直接倒在水槽中,应先稀释、然后倒入水槽,再用大量自来水冲洗水槽及下水道。
(7)生物材料如微生物、动物组织和血液都可能存在细菌和病毒感染的潜伏性危险,因此处理各种生物材料必须谨慎、小心,做完实验后必须用肥皂、洗涤剂或消毒液洗净双手。
(8)进行遗传重组的实验时应根据有关规定加强生物安全的防范措施。
2.实验室应急处理
(1)在生物化学实验中,如发生受伤事故,应立即适当地采取急救措施:如不慎被玻璃割伤或其他机械损伤,应先检查伤口内有无玻璃或金属等物碎片,然后用硼酸水洗净,再涂擦碘酒或红汞水,必要时用纱布包扎。若伤口较大或过深,应迅速在伤口上部和下部扎紧血管止血,送医院诊治。
(2)轻度烫伤时一般可涂上苦味酸软膏。如果伤处红痛(一级灼伤),可擦医用橄榄油;若皮肤起泡(二级灼伤),不要弄破水泡,防止感染;若烫伤皮肤呈棕色或黑色(三级灼伤),应用干燥无菌的消毒纱布轻轻包扎好,急送医院治疗。
(3)皮肤不慎被强酸、溴、氯气等物质灼伤时,应用大量自来水冲洗,然后再用5%的碳酸氢钠溶液洗涤。
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