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生物技术综合实验教程(普通高等教育规划教材,生物科学生物技术系列)

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  分類: 图书,教材教辅与参考书,
  品牌: 梁红

基本信息·出版社:化学工业出版社

·页码:181 页

·出版日期:2010年01月

·ISBN:9787122069795

·条形码:9787122069795

·版本:第1版

·装帧:平装

·开本:16

·正文语种:中文

·丛书名:普通高等教育规划教材,生物科学生物技术系列

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内容简介《生物技术综合实验教程》以生物技术为理论基础,涵盖了细胞工程、发酵工程、酶工程、基因工程等主要内容。全书分为8章共38个实验,分别从植物细胞工程实验技术、微生物工程实验技术、蛋白质与核酸的提取分离、色谱及电泳技术、PCR反应、分子杂交技术、基因重组及基因文库的构建这几大方面来构建全书的知识构架,内容顾及生物技术的实验室研究与工业化应用两个方面,力求通过综合实验的训练来强化读者对生物技术的理解与认识。《生物技术综合实验教程》的附录收集了各实验所涉及的主要缓冲液配方和基本实验数据等,方便读者独立进行实验和自主性操作。

《生物技术综合实验教程》可以作为农林、综合、师范等高等院校生物及相关专业的教材或教学参考书,也可供生物技术领域的专业技术人员使用和参考。

编辑推荐《生物技术综合实验教程》:普通高等教育规划教材,生物科学生物技术系列

目录

第一章 导言1

一、生物技术主要概念及技术简介1

二、生物技术实验室安全性、药品试剂配制及实验报告要求3

三、生物技术常用实验仪器及其使用方法7

参考文献16

第二章 植物细胞工程实验技术17

实验一 培养基的配制、消毒与接种17

实验二 植物愈伤组织诱导及分化培养24

实验三 花药培养28

实验四 细胞悬浮培养31

实验五 原生质体的游离、培养与融合34

实验六 植物细胞的生长计量技术39

实验七 植物快速无性繁殖42

实验八 细胞大规模培养及人工种子制备46

实验九 农杆菌介导的植物遗传转化50

参考文献53

第三章 微生物工程实验技术54

实验一 培养基的配制及灭菌54

实验二 菌种的分离纯化60

实验三 微生物形态的观察和革兰染色法62

实验四 稀释平板计数法和细菌生长曲线的测定64

实验五 发酵罐的构造与实罐灭菌67

实验六 谷氨酸发酵工程系列实验71

Ⅰ谷氨酸菌种的制备72

Ⅱ谷氨酸的中糖发酵及控制74

Ⅲ谷氨酸发酵过程还原糖含量的测定75

Ⅳ谷氨酸含量的测定与等电回收77

实验七 啤酒发酵工程系列实验78

Ⅰ协定法糖化试验79

Ⅱ啤酒酵母纯种分离80

Ⅲ啤酒酵母的计数81

Ⅳ啤酒酵母的质量检查83

Ⅴ啤酒酵母的扩大培养85

Ⅵ麦芽汁的制备85

Ⅶ糖度的测定87

Ⅷ啤酒主发酵88

Ⅸ酸度和pH值的测定89

Ⅹ酒精度的测定及原麦芽汁浓度的计算90

Ⅺ色度的测定93

Ⅻ苦味质的测定94

ⅩⅢ啤酒质量品评95

参考文献98

第四章 蛋白质、核酸的提取与分离99

实验一 酪蛋白的分离提取99

实验二 溶菌酶的提纯与结晶101

实验三 植物基因组DNA提取103

实验四 质粒DNA的分离提取104

实验五 植物RNA提取106

参考文献108

第五章 色谱及电泳技术110

实验一 薄层层析法进行转氨酶活性鉴定110

实验二 气相色谱内标法测定丁醇的含量112

实验三 高效液相色谱法(HPLC)分析多维片或饮料中VC和VB的含量114

实验四 DNA琼脂糖凝胶电泳116

实验五 SDS-PAGE测定蛋白质的相对分子量118

实验六 非同位素银染DNA测序技术122

实验七 纤维素薄膜电泳分离血清蛋白及永久胶片制作129

参考文献133

第六章 聚合酶链式反应(PCR)135

实验一 常规PCR法扩增目的潮酶素基因片段135

实验二 PCR法制备潮酶素基因探针138

实验三 逆转录PCR(RT-PCR)139

实验四 随机引物PCR141

参考文献143

第七章 分子杂交技术144

实验一 核酸分子杂交技术144

实验二 Western杂交147

参考文献149

第八章 基因重组及基因文库构建150

实验一 DNA酶切、片段回收与重组连接150

实验二 重组体DNA遗传转化与克隆筛选153

实验三 真核生物基因组文库的构建155

实验四 cDNA文库的构建158

参考文献165

附录167

附录一 常用激素的溶解167

附录二 常用消毒剂的使用和效果167

附录三 植物组织培养常用的培养基配方168

附录四 Kao和Michayluk的KM8P培养基169

附录五 细胞筛孔径(μm)与目换算表169

附录六 GUS染色方法169

附录七 主要溶液(母液)及缓冲液配制170

附录八 常见市售酸碱的浓度172

附录九 基因组文库载体的种类和特征172

附录十 生命科学常用实验仪器名称中英文对照表173

附录十一 几种主要的限制性核酸内切酶及其作用位点174

附录十二 几种主要的质粒载体的酶切位点及其选择标记175

附录十三 实验报告参考式样178

附录十四 有关警告标志181

……[看更多目录]

序言现代生物技术以分子生物学为基础,囊括了微生物学、植物生物学、动物生物学、细胞生物学、生物化学、遗传学等学科的技术成果,是当前生命科学中最活跃和最重要的技术领域。现代生物技术始于20世纪70年代的DNA重组技术,其迅猛发展使传统生物技术发生了日新月异的变化,在改进原有的技术方法的同时,也催生了一大批新的技术方法、技术产品并扩展了其应用领域。生物技术的发展,使人们在了解生命的奥秘和生命现象的本质、认识生物体的结构、功能与生命活动规律等方面有了高效精深的技术手段和前所未有的发展机遇。生物技术在工业、农业、医药卫生和商业服务的应用,孕育并催生了生物技术产业,已成为2l世纪的高新技术产业和前景广阔的朝阳产业。

近20多年来,生物技术取得了日新月异的进展,继人类基因组计划之后,一批重要的植物、动物和微生物的基因组测序工作相继完成,生命科学进入了后基因组时代,各种组学、生物信息学和系统生物学已成为关注的热点和未来学科发展的新增长点。随着生物技术的发展,原有的研究方法和技术不断改进,新的技术、方法和仪器设备不断涌现,但最基本的实验技术和仪器设备仍然在大部分实验室中得以运用,具有很好的稳定性、可操作性和可延伸性,这就是我们编写本书的初衷和选取实验的基本原则。本书各章节除了介绍主要技术方法,还包括部分实际应用的案例,涉及细胞工程、微生物工程、DNA扩增及分子杂交等基因工程方面的主要实验内容,力求针对本科院校应用型、复合型人才培养的要求,做到理论联系实际、重点突出、可操作性强。

本书的各章节分别由以下人员完成:第一章由梁红编写,第二章由周玲艳编写,第三章由冯飞编写,第四章由梁雪莲编写,第五章由张伟丽和梁雪莲编写,第六章由梁红、张伟丽和梁雪莲编写,第七章由梁红编写,第八章由梁雪莲、梁红和张伟丽编写,最后由主编负责统稿。在本书的编写过程中,得到作者所在单位仲恺农业工程学院教材出版计划的立项资助和仲恺农业工程学院特色专业建设点项目的支持,也是学院多位教师近年来实践教学和科学研究的经验总结。我们还要衷心感谢化学工业出版社的鼓励、督促和编辑们的辛勤劳动,使本书得以顺利出版。

文摘插图:

生物技术综合实验教程(普通高等教育规划教材,生物科学生物技术系列)

④电源、液位熔丝为1A;推进熔丝为5A;制冰熔丝为10A。

⑤发生异常响声时即刻停机检查。

⑥待储冰箱内冰滞之前将制冰机停止,同时关闭电源。

(14)YX280A手提式不锈钢蒸汽消毒器

①堆放将待灭菌的物品予以妥善包扎,各包之间留有间隙,这样有利于高压蒸汽的穿透,提高灭菌效果。

②加水在外桶体内注入清水,水位一定要超过电热管2cm以上(但不宜过多),连续使用时,必须在每次操作前补足上述水位,以免烧坏电热管和发生意外。

③密封灭菌物品堆放后,盖上锅盖时请将放汽软管插入储物桶内侧的半圆槽内,对准上下螺栓槽,依次、逐步、均匀拧紧螺母(可使用随机附件——扳手加力),使盖与主体紧密贴合,防止漏气。

④加热供电电源应与铭牌标志电源一致,且配备带闸刀的电源板(应有接地线连通大地),将电源插头插入您的配电板同规格插座,按动座圈上带指示灯的电源开关,指示灯亮,即开始加热。(工作结束时,只要同法关闭加热电源即可,无须插拔插头)。加热开始后,应先将放汽阀的小扳手提到竖直位置,使桶内空气和冷凝产生的水随加热时产生的压力逸出,待有较急的蒸汽喷出时,再将小扳手置回原位,此时压力表指针会随着加热逐渐上升,指示消毒器内的压力。

⑤灭菌当压力到达所需的范围时,开始计算灭菌所需时间,并使之维持恒压(表1-1)。当应用0.14MPa(124~126~C:)灭菌时,则安全阀能使之维持恒压,若采用低于上述的温度时,则应接上一只调压变压器在蒸汽压力到达所需范围时,用调低电压来维持恒压。

⑥干燥对医疗器械、敷料和器皿等物品在灭菌后要迅速使之干燥,可在灭菌终了时,将消毒器内的蒸汽通过放汽阀,予以迅速排出,待压力表指针回复至零位,然后将锅盖打开。马上取出被灭菌的物品,室温下冷却后待其自然会干燥或在打开锅盖后再继续加热5min左右,取出物品备用。

 
 
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