现代生物学实验技术指导(21世纪高等学校研究生教材，生命科学系列教材)
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品牌: 向本琼
基本信息·出版社：北京师范大学出版集团，北京师范大学出版社
·页码：512 页
·出版日期：2009年09月
·ISBN：9787303104536
·条形码：9787303104536
·包装版本：第1版
·装帧：平装
·开本：16
·正文语种：中文
·丛书名：21世纪高等学校研究生教材，生命科学系列教材
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内容简介《现代生物学实验技术指导》内容简介：综览目前的实验教材或参考书，还没有一本囊括现代生物技术中多学科交叉的实验内容于一体，并适合于生物学高年级本科生及研究生进行综合科研素质和实践技能训练的实验教材或参考书。在这样的背景下，国内迫切需要一部实验课程体系和内容的设置以系统综合大实验为核心和以科学研究思路为线索，并融合多学科交叉的现代生物技术于一体的实验教材或参考书。
编辑推荐《现代生物学实验技术指导》：21世纪高等学校研究生教材，生命科学系列教材。
目录
第1篇 常用现代生物学实验技术及原理
第1章 显微技术
1.1 明视野显微镜
1.2 暗视野显微镜
1.3 相差显微镜
1.4 微分干涉差显微镜
1.5 荧光显微镜
1.6 激光扫描共聚焦显微镜
1.7 多光子荧光显微镜
1.8 电子显微镜
第2章 切片技术
2.1 石蜡切片技术
2.2 碳蜡切片技术
2.3 冷冻切片技术
2.4 超薄切片技术
2.5 其他切片技术
第3章 层析技术
3.1 层析技术的定义及分类
3.2 色谱图及其专业术语
3.3 层析分离的基本理论和重要参数
3.4 层析定性定量分析的基本原理及方法
3.5 层析技术的基本操作
3.6 常用的色层分离技术简介
第4章 电泳技术
4.1 电泳的基本原理
4.2 琼脂糖凝胶电泳
4.3 聚丙烯酰胺凝胶电泳
4.4 毛细管电泳
4.5 单细胞凝胶电泳
第5章 核酸研究技术
5.1 核酸的分离纯化与鉴定
5.2 核酸的序列分析
5.3 基因扩增
5.4 分子杂交
5.5 ：DNA重组
5.6 目的基因的分离与克隆
5.7 基因功能研究
5.8 生物芯片
5.9 噬菌体展示和细菌表面展示
5.10 分子标记
第6章 蛋白质研究技术
6.1 蛋白质的分离纯化与检测
6.2 蛋白质结构研究技术
6.3 蛋白质的变复性研究技术
6.4 蛋白质相互作用研究技术
6.5 蛋白质组学研究技术
第7章 免疫学相关技术
7.1 抗体的制备
7.2 标记免疫技术
7.3 免疫细胞化学技术
第8章 细胞研究技术
8.1 动物细胞培养的基本原理与技术
8.2 植物组织培养的基本原理与技术
8.3 流式细胞术
第9章 中药研究相关技术
9.1 中药有效成分的分离纯化
9.2 药理学简介
9.3 动物实验基本常识及常用技术
9.4 整体动物实验研究技术
9.5 离体实验研究技术
9.6 分子水平的药理药效学研究技术
9.7 新药临床前及临床药理学研究简介
9.8 药物筛选方法简介
9.9 抗肿瘤药物的药理药效学研究方法
第2篇 学生实验
实验1 碱性磷酸酶突变体的构建及其结构功能分析
实验2 小鼠碱性磷酸酶基因的克隆及其在昆虫细胞中的表达
实验3 酵母双杂交法寻找烟草CaM结合蛋白
实验4 烟草突变体库的构建及其T-DNA侧翼序列的分析41
实验5 RNAi研究线虫肌丝蛋白unc22基因的功能
实验6 细菌表面展示绿色荧光蛋白GFP
实验7 辽东栎的分子标记分析
实验8 烟草原生质体分离和体细胞杂交
实验9 红豆杉次生代谢产物紫杉醇的生产与检测
实验10 紫杉醇诱导宫颈癌Hela细胞凋亡作用机制的研究
实验11 紫杉醇的在体药理学研究
实验12 单克隆抗体的制备
第3篇 附录
附录1 常用缓冲液及培养基的配制
1.1 常用pH缓冲液的配制
1.2 常用电泳缓冲液及凝胶加样缓冲液
1.3 常见限制性内切酶的酶切位点及其缓冲液
1.4 常用抗生素溶液
1.5 常用培养基
附录2 相关实验资料和常用数据
2.1 常用单位及换算方法
2.2 氨基酸符号及相应密码子
2.3 常用核酸与蛋白质换算数据
2.4 离心机转速与相对离心力的换算
2.5 常见市售酸碱的浓度
2.6 几种主要同位素的衰变及半衰期
2.7 硫酸铵饱和度表
2.8 常用层析介质
2.9 菌种保存
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序言现代生物技术迅猛发展，取得了令人瞩目的成就，推动着科学的进步，促进着经济的发展，改变着人类的生活与思维，影响着人类社会的发展进程；同时它也是21世纪高新技术革命的核心内容，具有巨大的经济效益和现实的与潜在的生产力。实验技能训练是传授知识和培养科研能力、创新能力、分析问题与解决问题等的综合实践能力的重要阵地，也是全面提高人才培养质量和素质的关键之所在。
综览目前的实验教材或参考书，还没有一本囊括现代生物技术中多学科交叉的实验内容于一体，并适合于生物学高年级本科生及研究生进行综合科研素质和实践技能训练的实验教材或参考书。在这样的背景下，国内迫切需要一部实验课程体系和内容的设置以系统综合大实验为核心和以科学研究思路为线索，并融合多学科交叉的现代生物技术于一体的实验教材或参考书。
文摘插图：
（3）原生质体的纯化
沉降法：在酶解处理中用相对分子质量较小的甘露醇作为渗透压调节剂时，将收集的滤液低速离心，使原生质体沉降于管底。转速的控制以将原生质体沉淀而细胞碎片等杂质仍悬浮在上清液中为佳，一般于500～800rpm的转速下离心3～5min。用吸管小心地吸取上清液，再用洗涤液重新悬浮原生质体，再次离心，除去上清液，如此重复3次。最后用原生质体培养基洗涤1次，然后用培养基将原生质体调整到一定密度后进行培养。这种方法的优点是纯化收集方便，操作简单，原生质体丢失少。但这种方法在漂洗过程中易造成原生质体的损伤，并且纯度不够好，常存在少量脱壁不完全的细胞和破碎的原生质体。
漂浮法：在酶解处理中用相对分子质量较大的蔗糖作为渗透压调节剂时，将收集的滤液于1000rpm匀转速下离心10min，原生质体将漂浮于溶液的表面，细胞碎片等杂质将下沉到管底。用无菌吸管小心地将原生质体吸出，转入到另一离心管中，这样反复离心和重新悬浮3次，用原生质体培养基洗涤1次后调整到所需密度进行培养。这种方法的优点是可以收集到较为纯净的原生质体，并且可以避免在离心纯化过程中因振荡撞击或挤压引起的原生质体破裂或损伤，所用试剂简单，成本低。但用这种方法纯化，原生质体在数量上损失较多，从而造成原生质体的获得率较低。
梯度离心法：用比重不同的溶液，经离心后使完整无损的原生质体处在两液相的界面之间，而细胞碎片等杂质则沉于管底，用这种方法可获得更为纯净的原生质体。
